PepT1基因绝对荧光定量PCR标准曲线的建立

摘要：

为研究 PepT1 mRNA 在鸡小肠的表达对于蛋白质消化吸收的影响,实验建立了 PepT1 基因绝对荧光定量PCR标准曲线.根据GenBank中 PepT1 的序列信息设计合成两对引物,引物一是克隆引物,用于从鸡小肠细胞中扩增出cDNA片段;引物二是荧光定量PCR引物,其长度包含于引物一中,用荧光定量PCR来检测基因的表达.通过克隆出 PepT1 基因282 bp部分片段并插入到PMD18载体中,从而构建出绝对荧光定量PCR标准曲线.从实验结果得出标准曲线的回归方程为Y=-3.205X+34.170,其回归系数R2=0.990,溶解曲线表现为单一的峰,通过对结果的具体分析,认为该方法可靠,特异性均较强,可成功构建目的基因的标准曲线.

关键词：鸡小肠、PepT1、荧光定量PCR、标准曲线

所属期刊栏目：30

分类号：Q75(分子遗传学)

资助基金：863项目2008AA101009;中国博士后科学基金20090451360;山西省回国留学人员科研资助项目2009035;山西农业大学科技创新基金200902

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：332-335