10.3969/j.issn.1671-8151.2008.01.017
一株H9(N2)型禽流感病毒HA基因的克隆与序列分析
利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出禽流感病毒(H9亚型)血凝素的cDNA.通过T-A连接将已加A尾的PCR产物连接到线状克隆载体pGEM-Teasy vector,转化JM109感受态细胞,在含氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆.经PCR扩增,进一步确证为目的片段.对目的片段进行测序,结果获得该毒株的HA基因全长.与已知序列进行同源性比较,同源性最高的可达98%,表明这些分离株的亲缘关系较近;系统发育分析表明,该毒株属欧亚种系;通过血凝素裂解位点的氨基酸序列分析可知,该分离株的HA切割位点上未见到典型的高致病力毒株H5、H7所具有的一系列碱性氨基酸,其排列顺序为-PARSSRGLF-.所克隆的基因为禽流感病毒HA基因芯片的研究奠定了基础,同时为诊断和预防AI提供了理论依据.
禽流感病毒、HA基因、克隆
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S852.659.5;Q785(动物医学(兽医学))
山西农业大学校科研和教改项目2004060
2008-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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