10.3969/j.issn.1672-5565.2010.03.020
德氏乳杆菌保加利亚亚种电转化平台的构建和优化
德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)是最具经济价值的乳酸菌之一,在世界上广泛应用于酸奶和其它发酵乳生产.当前对该菌的代谢机制研究甚少.外源基因的转化效率是制约其分子代谢机制研究的重要因素.本研究以pMG36c为材料,对L.delbrueckii subsp. bulgaricus CH3进行电转化条件研究.结果表明,在电转化过程中,电场强度、质粒的浓度、细胞生长状态均对转化效率有明显影响,得到了该菌株的最适电转化条件为:对数初期的细胞,质粒浓度为100 ng/50 μl菌液,在10 kV/cm电场强度下电转化,转化后细胞在复壮培养液中培养3 h后涂布选择性培养基,转化率可达2.6×103CFU/μg DNA.以甘氨酸、醋酸锂、二硫苏糖醇处理细胞壁,发现醋酸锂和二硫苏糖醇共同处理对转化效率有明显改善,可提高转化效率.
德氏乳杆菌保加利亚亚种、电转化、生长时期、电场强度、质粒浓度、电转化效率
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Q933(微生物学)
国家863计划2007AA10Z354;国家自然科学基金30901048;哈尔滨工业大学科研创新基金HIT. NSRIF. 2008.19
2010-11-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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267-270