RAS-RAF蛋白相互作用结构域的单分子力谱分析
利用自行构建的光镊系统,通过in vitro单分子力谱测量,在单分子水平研究了RAS/RAF/MEK/ERK信号传导通路中的重要信号传导蛋白RAF与其上游G蛋白RAS结合的势垒形态.RAS与野生型RAF的单分子结合力分布情况显示,RAS-RAF结合至少涉及RAS结合区(RAS binding domain,RBD)及半胱氨酸富集区(cysteine rich domain,CRD)两个作用位点.而RAS与RAF突变体RAF (Q257R)的单分子结合力分布,存在两个以上的结合域:最可几力为95 pN的包络对应RAS-RAF[RBD]结合；最可几力为117pN的包络对应RAS-RAF[CRD]结合；最可几力为159 pN的包络对应RAS-RAF[RBD]和RAS-RAF[CRD]同时存在(叠加)时的相互作用.而且在大于200 pN的范围(光镊有效量程之外),RAS与RAF(Q257R)的结合力仍然有相当的概率分布.这说明,突变体RAF (Q257R)比其野生型更易于与RAS结合,且可能涉及新的结合位点.该发现对解释Q257R的致病机理及设计拮抗剂均有重要指导意义.
光镊:单分子力谱、RAS-RAF相互作用结构域
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Q615(理论生物物理学)
国家自然科学基金;北京市自然科学基金;国家重点基础研究发展计划（973计划）
2012-01-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
941-947
