小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区的克隆、表达及生物活性分析

摘要：

核因子κB受体活化因子配基是诱导破骨细胞分化、成熟的关键因子,在生物医学研究中应用广泛.本实验以小鼠的骨髓细胞cDNA为模板,采用PCR技术获得小鼠核因子κB受体活化因子配基活性区基因,并将该基因克隆至His标签的融合蛋白表达载体pET28a(+),经鉴定正确的质粒转化至BL21表达菌株中.通过调节诱导目的蛋白表达的培养温度、TPTG浓度及诱导时间,筛选出重组融合蛋白表达的最佳条件.将纯化后的重组蛋白稀释成不同浓度,刺激小鼠破骨前体细胞Raw264.7细胞分化,经抗酒石酸酸性磷酸酶染色后可见破骨细胞的形成,表明该重组蛋白具有较好的生物活性,可替代商品化的鼠源核因子κB受体活化因子配基.

关键词：小鼠核因子κB受体活化因子配基、基因克隆、原核表达、破骨细胞分化

所属期刊栏目：26

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：上海市科委研发公共服务平台"细胞信号转导网络研究技术";国家自然科学基金

在线出版日期：2010-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：790-798