菠菜叶绿体CF1-ATP合酶的分离纯化及其结构的原子力显微镜研究

摘要：

用纤维素DE-52柱层析和硫酸铵分级分离法快速分离、纯化获得CF1-ATP合酶,聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对其纯度和凝胶内酶活性进行检测,研究了温度、pH值、盐浓度对CF1水解酶活性的影响,用原子力显微镜对CF1的形态结构进行了观察.结果发现,当pH值为8.0时,CF1可在0℃存放数天并保持其50%的活性,20%的甲醇溶液能够有效地保护酶分子的结构;实验还通过低温盐解作用获得了具有活性的亚基;用原子力显微镜观测显示CF1-ATP合酶分子平均大小约为18nm,按其直径大小可以分为三类,推测其分别对应着ATP合酶的三种状态,即空置态、疏松结合态和紧密结合态.

关键词：叶绿体、CF1-ATP合酶、AFM、水解活性

所属期刊栏目：24

分类号：Q615(理论生物物理学)

资助基金：国家自然科学基金20572067;教育部科学技术研究重点项目104167

在线出版日期：2008-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：92-98