斑马鱼VEGF基因的siRNA表达载体构建、有效序列筛选及其对基因表达的干预性研究

摘要：

为探索小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)表达质粒在研究斑马鱼血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因调控网络中的应用,构建了4个以斑马鱼VEGF基因为靶点的siRNA表达载体pS1-VEGF、pS2-VEGF、pS3-VEGF及pS4-VEGF.通过显微注射的方法将载体导入1-2细胞期斑马鱼体内,于胚胎发育的48 h采用RT-PCR的方法检测VEGF基因的表达量,研究不同干扰序列对VEGF基因表达的干涉作用.结果显示,成功地构建了siRNA表达载体.针对不同位点的寡核苷酸序列抑制VEGF基因表达的效率有显著差异,其中注射了pS1-VEGF的胚胎出现了心包膜水肿、血流速度减慢、循环红细胞堆积等症状,同时肠下静脉、节间血管以及其它血管出现不同程度的发育缺陷.实验结果说明,pS1-VEGF可引起斑马鱼胚胎血管发育缺陷.

关键词：RNA干扰、斑马鱼、血管生成、血管内皮生长因子

所属期刊栏目：23

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金40506031

在线出版日期：2007-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：364-370