TLR4全长及其截断体重组腺病毒对Rf-6A细胞骨架的影响

摘要：

为了研究LPS受体TLR4全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(△TLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒对内皮细胞系Rf-6A骨架蛋白的影响,采用PCR方法扩增目的基因片段,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,用BJ5183细菌同源重组法将目的基因重组于腺病毒骨架载体,重组腺病毒质粒经Pac I酶切线性化后,用脂质体法转染293细胞进行腺病毒的包装扩增,用重组腺病毒感染Rf-6A细胞,采用免疫荧光标记方法观察结果.免疫荧光标记结果表明Ad-△TLR4明显抑制了LPS引起的细胞骨架F-actin的解聚与重排,Ad-TLR4则使LPS引起的F-actin应力纤维产生增强.以上结果说明TLR4全长及其截断体的重组腺病毒感染内皮细胞对LPS诱导的细胞骨架变化具有不同的影响,Ad-△TLR4对LPS引起的内皮细胞骨架变化具有抑制作用.

关键词：腺病毒、细胞骨架、toll样受体4、脂多糖

所属期刊栏目：20

分类号：Q78;R363(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金39925014;国家自然科学基金39830400;国家重点基础研究发展计划973计划2002CB513000

在线出版日期：2004-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：119-124