敲除msn2对米曲霉生长和发酵产曲酸的影响

摘要：

Msn2作为C2H2型锌指结构转录激活因子,参与调控真菌生长速率、分生孢子发育及多种应激反应等生物学过程.本论文以产曲酸米曲霉3.042为出发菌株,构建pyrG营养缺陷型菌株,通过msn2基因的上下游序列为同源重组臂和回补pyrG基因为筛选标记,最终获得一株敲除msn2且回补pyrG基因的转化子g-5号菌株.较原始菌株米曲霉3.042相比,g-5菌株生长受到抑制且孢子生成量显著降低60％,在含10％及以上葡萄糖环境中不产孢,但可耐受30 mmol/L H2O2.g-5菌株摇瓶发酵曲酸产量达到21.55 g/L,较米曲霉3.042的11.86 g/L,提升了81％.经RT-qPCR分析,与米曲霉3.042相比,g-5菌株的msn2基因不表达;在发酵6 d时米曲霉调节曲酸合成相关基因kojR和LaeA基因表达量分别提高4.13倍和21倍;g-5菌株菌丝生长及产孢相关基因brlA与tps1表达量较3.042下调63倍和128倍,相反ageB基因表达量大幅上调59倍.

关键词：米曲霉、msn2、基因敲除、曲酸

所属期刊栏目：38

分类号：Q939.5;S435.131;Q5

资助基金：天津市自然科学基金重点项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2022-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：188-197