定向进化提高来源于Arthrobacter ramosus的MTHase的热稳定性

摘要：

麦芽寡糖基海藻糖水解酶(mahosyhrehalose hydrolase,MTHase)是以淀粉或麦芽糊精为底物制备海藻糖的关键酶之一.来源于Arthrobacter ramosus的MTHase,表达量好,比活高,但热稳定性差,限制了其工业化应用.采用定向进化技术,筛选得到L137M和A216T两个突变体,在60℃下,野生型和两个突变体的半衰期(t1/2)分别为15.5、20.5和23.3 min,L137M和A216T的t1/2分别比野生型提高1.3和1.5倍.进一步考察了L137M、A216T和野生型酶在60℃分别和同样来源于Arthrobacter ranosus的麦芽寡糖基海藻糖合成酶(maltosyltrehalose synthase,MTSase)复配制备海藻糖,在相同的加酶量下,野生型、L137M和A216T的海藻糖转化率分别为51.3％,52.6％和55.7％,两个突变体的转化率都比野生型提高,说明突变体提高的热稳定性有利于海藻糖的转化率.

关键词：热稳定性、麦芽寡糖基海藻糖水解酶、定向进化、Arthrobacter ramosus、海藻糖

所属期刊栏目：37

分类号：Q78;Q93-33;TS2

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;优秀青年科学基金

在线出版日期：2021-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：84-91