Mxr1磷酸化水平受Ptp调控机理的初步研究

摘要：

通过PULL-DOWN找到与巴斯德毕赤酵母转录激活因子Mxr1相互作用的小分子酪氨酸磷酸酶Ptp,并验证其去磷酸化功能,可以使磷酸化的Mxr1第215位丝氨酸的磷酸基团水解.用Mxr1第215位特定位点磷酸化抗体Western blot检测Mxr1S215在不同培养基中磷酸化情况.发现野生菌株中Mxr1在甘油培养基没有磷酸化,在甲醇培养基发生磷酸化.在Ptp高表达菌株中,无论在甘油还是甲醇培养基Mxr1都没有发生磷酸化,而在Ptp敲除菌株中磷酸化明显高于野生型菌株,说明Ptp调控Mxr1磷酸化.在大肠杆菌中表达并纯化,测定了Ptp酶学性质.构建了巴斯德毕赤酵母Mxr1S215A突变株,发现多个与甲醇代谢相关的基因在转录水平发生变化,推测其可能受S215位点磷酸化Mxr1的调控.

关键词：巴斯德毕赤酵母、转录激活因子Mxr1、磷酸酶、磷酸化

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资助基金：国家自然科学基金项目21808082,21878124;江苏省研究生科研创新计划项目KYCX18_1803,KYCX18_1904

在线出版日期：2019-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：108-113