葡萄穗霉中β-葡萄糖苷酶的基因克隆、表达及酶学性质分析

摘要：

以黑曲霉(Aspergillus niger)G1为宿主茵表达葡萄稳霉(Stachybotrys chartarum)β-葡萄糖苷酶.对葡萄穗霉进行全基因组分析得到编码β-葡萄糖苷酶的基因,设计引物,通过PCR扩增得到g10158,将其克隆到载体pGm上,并转化到黑曲霉G1中,经amdS二次平板筛选,PCR方法验证,获得高效表达该基因的生物工程菌株G1-pGm-g10158-13.SDS-PAGE检测结果显示,表达蛋白的分子大小为87.9 kD,阴性对照中无此条带.粗酶液酶学性质表明,该β-葡萄糖苷酶的最适反应温度为50℃,最适pH为4.8.在最适pH和最适温度下,粗酶液活性达1856.48 U/mL.葡萄穗霉B-葡萄糖苷酶在黑曲霉G1中可表达,并具有较高的活性.

关键词：β-葡萄糖苷酶、葡萄穗霉、黑曲霉G1、原核表达

资助基金：天津科委真菌-淀粉酶高温活性改造102CKFSY06200;天津市工业微生物基因组解析11ZCZDSY08300

在线出版日期：2013-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：128-132