高效柴油降解菌Acinetobacter sp.W3分离鉴定及降解酶基因扩增分析

摘要：

从柴油污染的海水样品中分离高效柴油降解细菌,分析菌株对柴油的降解能力及降解酶基因,为海洋柴油污染的生物修复奠定基础.选取浙江定海港柴油污染的海水样品,进行降解菌的富集培养；采用常规方法分离筛选高效柴油降解菌.利用革兰氏染色、形态学观察、生理生化鉴定及16S rDNA分析等方法对降解菌株进行种属鉴定.采用紫外吸收法测定菌株对柴油的降解率.采用PCR方法、核酸序列测定和比对,对其降解酶基因进行扩增分析.筛选出一株高效降解菌,形态学观察及生理生化鉴定初步确定为不动杆菌.16S rDNA序列分析及比对结果表明,其16S rDNA序列与威尼斯不动杆菌(Acinetobaaer venetianus)属的序列同源性达到99.7％,命名为不动杆菌W3(Acinetobacter sp.W3),该菌对柴油的7d降解率达到84.7％.PCR方法从Acinetobacter sp.W3菌株中的基因组DNA和质粒DNA上扩增到了大小为540bp的烷烃羟化醇基因alkB和864 bp的CYP153A部分DNA片段,分别与Acinetobacter venetianus l-D-2的alkB和Acinetobacter sp.OC4、Acinetobacter sp.EB104的CYP153具有99％和98％的同源性.从定海港口柴油污染海水分离得到一株高效柴油降解菌Acinetobacter sp.W3,该菌属于不动杆菌属,舍有烷烃降解酶基因,能高效降解柴油污染物,有望应用于海水柴油污染的生物修复.

关键词：柴油降解菌、alkB、CYP153A、柴油污染、生物修复

分类号：X17;X52

在线出版日期：2012-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：159-165