米根霉糖化酶、类芽孢杆菌木聚糖酶融合蛋白的真核分泌表达
以米根霉(Rhizopus oryzae)3.866基因组DNA为模板,克隆得到糖化酶基因(glucoamylase gene,amyA),基因全长2049bp,编码604个氨基酸;以类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)H10-3基因组DNA为模板,克隆出基因木聚糖酶基因(xylanase A gene,xynA)的成熟肽编码序列,长636bp,编码211个氨基酸。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)得到拼接片段amyA-l-xynA,并将其克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9中,得到重组质粒pPIC9-amyA-l-xynA,重组质粒线性化后经电击转化到毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,得到了表达成功的工程菌AX11。在AX11发酵上清液中同时检测到糖化酶活性(5.8U/mL)和木聚糖酶活性(32.3U/mL)。
糖化酶、木聚糖酶、融合表达、毕赤酵母
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Q786(基因工程(遗传工程))
国际先进农业科学与技术项目农业部948项目2011-Z09;农业部农村能源综合建设项目2130138-018;中国农业科学院作物科学研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目2060302-13
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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276-281