来源于耐碱真菌Pseudallescheria sp.JSM-2的碱性木聚糖酶基因的克隆、表达及其性质研究
从造纸废水中分离得到的耐碱真菌Pseudallescheria sp.JSM-2的DNA为模板,利用同源克隆和TAIL—PCR的方法,获得了一个碱性木聚糖酶基因xflll—1。该基因DNA和cDNA分别为797bp和678bp。该基因的推测蛋白N.端有一个18个氨基酸的信号肽序列和一个含207个氨基酸的成熟蛋白。编码成熟蛋白的cDNA序列在毕赤酵母GS115中重组表达后,进一步纯化并进行酶学性质测定。重组XYL11—1的最适pH为6.5,在pH4.5~9.0范围有50%以上的酶活;在pH4.5—12.0范围具有良好的pH稳定性;最适温度为50℃;以燕麦木聚糖为底物,比活为2618U/mg;且对中性和碱性蛋白酶具有极好的抗性。该酶作用底物范围广,包括各种木聚糖、纤维素和葡聚糖,易于工业化发酵生产,具有在纸浆脱墨、动物饲料、鱼类饵料中的应用潜力。
Pseudallescheria、sp.JSM-2、碱性木聚糖酶、基因克隆与表达、毕赤酵母
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Q786(基因工程(遗传工程))
基金项目:国家转基因生物新品种培育重大专项2008ZX003-002;国家肉鸡产业技术体系项目nycytx42-G2-05
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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