关岭牛MyoD1与MSTN基因相互表达调控

摘要：

[目的]旨在验证牛MyoD1与MSTN在表达调控上的相互作用.[方法]首先,以构建的pEGFP-N3-MyoD1和EGFP-N3-MSTN过表达载体,分别在两组关岭牛原代成肌细胞中过表达MyoD1和MSTN,细胞转染24h后,qRT-PCR检测并分析各处理组细胞中MyoD1和MSTN相比表达情况.其次,以海肾荧光载体pRL-TK为内参质粒,在转染pGL-3-MSTN-pro质粒的关岭牛原代成肌细胞中过表达MyoD1,在转染pGL-3-MyoD1-pro质粒的关岭牛原代成肌细胞中过表达MSTN,共转染36 h后,双荧光素酶试剂盒检测分析各组细胞中相对荧光素酶活性变化.[结果]过表达MyoD1组细胞中MyoD1相对表达量相比对照组上调至8283.987±2337.534(P=0.004),MST的相对表达量上调至7.849±1.089 (P =0.0004);而MSTN过表达组细胞中MSTN相对表达量相比对照组上调至121131.802±12474.046(P=0.004),MyoD1基因的相对表达量下调至0.103±0.016(P=0.0001).进一步试验中,过表达MyoD1组细胞中相对荧光素酶活性变化相比对照组从1.131±0.051上调至3.030±0.212(P =0.0001);而过表达MSTN组细胞中相对荧光素酶活性变化相比对照组从1.797±0.136下调至0.543±0.092(P =0.0002).[结论]MyoD1的过量表达(P=0.004),会导致MSTN表达显著上调(P=0.0004);而MSTN的过量表达(P=0.004),可负向调节MyoD1表达(P=0.0001).此外MyoD1的过表达会增强MSTN启动子活性(P=0.0001);而MSTN的过表达会降低MyoD1启动子活性(P=0.0002).综上,MyoD1可正向调控MSTN表达,而MSTN也对MyoD1表达起负反馈调节作用.

关键词：关岭牛;MyoD1;MSTN;过表达;双荧光素酶;启动子

所属期刊栏目：31

分类号：S831.2(家禽)

资助基金：国家科技支撑计划2015BAD03B02-3

在线出版日期：2021-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：417-424