GLP-1衍生物多克隆抗体的制备及应用

摘要：

[目的]制备抗LmGLP-1的高特异性多克隆抗体,为LmGLP-1的活性和应用研究提供基础.[方法]以高纯度LmGLP-1为免疫原,对SD大鼠进行皮下注射免疫,获得抗血清,通过Western Blotting鉴定其特异性,采用ELISA测定多抗效价,建立间接ELISA测定LmGLP-1的工作曲线,并验证多抗在免疫沉淀(IP)和间接ELISA测定大鼠血样中LmGLP-1抗原的应用.[结果]获得的抗血清能特异性识别利用原核表达系统制备的LmGLP-1抗原,效价高达1∶16 000,建立的间接非竞争ELISA工作曲线在0.50～80 ng/mL范围内线性良好,检出限为0.25 ng/mL,能有效测定复杂血样中LmGLP-1的浓度.免疫沉淀反应显示,抗血清能识别大鼠体内的外源性LmGLP-1,也可识别低水平的内源性GLP-1.[结论]所制备的LmGLP-1抗血清具有良好的反应性和特异性,为后续LmGLP-1的机制研究和药效、药代动力学的开展提供了基础.

关键词：胰高血糖素样肽-1、多克隆抗体、ELISA、免疫沉淀

所属期刊栏目：31

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：广东省自然科学基金2015A030310015

在线出版日期：2021-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：171-175,128