一种PIC荧光免疫层析检测方法的建立

摘要：

[目的]建立一种PIC荧光免疫层析检测方法.[方法]以天然PIC为免疫原,使用快速免疫方案免疫BALB/C小鼠,利用常规单抗制备技术制备抗PIC单抗;以PIC、α2-AP、PLG为筛选源使用间接ELISA进行单克隆抗体筛选;通过Western Blot及间接ELISA对抗体的抗原识别表位及特异性进行鉴定;通过间接ELISA对抗体类型及亲和常数进行检测;通过双抗夹心法筛选出抗PIC抗体的最优配对,建立PIC的荧光免疫层析检测方法;对建立的方法进行灵敏度和精密度测试;使用65例临床样本初步评价与Sysmex试剂的相关性.[结果]获得了一对针对PIC新抗原的最优配对单抗B6A02和B6A23,抗体属于IgG并对PIC有较高亲和力(亲和常数达到10-9),并使用B6A02和B6A23分别作为包被抗体和检测抗体制备PIC检测试剂,该试剂在40～40 000 ng/mL范围内呈良好的线性关系(R2 = 0.997);灵敏度为40 ng/mL;批间CV不高于5.47％;与Sysmex的PIC检测试剂相关性良好(R2 =987).[结论]使用针对PIC新抗原表位建立了 PIC荧光免疫层析检测试剂,具有灵敏度高、精密度好、特异性强等特点,与Sysmex试剂检测结果符合率高.

关键词：纤溶酶-α2纤溶酶抑制剂复合物(PIC)、单克隆抗体、荧光免疫层析技术、相关性

所属期刊栏目：31

分类号：Q599

资助基金：国家自然科学基金81370894

在线出版日期：2021-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：38-45