细叶百合LpPEX5基因克隆及蛋白表达纯化

摘要：

”目的”探究LpPEX5蛋白表达与纯化的最佳条件.”方法”从细叶百合的鳞茎中克隆出过氧化物酶体生物合成蛋白基因(LpPEX5),在详细分析该蛋白质同源氨基酸序列比对、进化树、保守区域,二级结构与三级结构预测等生物信息学后,构建到pQE-30原核表达载体上,转化大肠杆菌M15,通过SDS-PAGE凝胶电泳对不同诱导时间、诱导温度、IPTG浓度影响蛋白的表达量进行研究.利用亲核层析树脂纯化获得融合蛋白.”结果”成功克隆出LpPEX5基因,构建pQE-LpPEX5原核表达载体并且诱导和纯化出LpPEX5蛋白.”结论”LpPEX5蛋白的最佳诱导条件为30℃,1 mmol/L IPTG诱导5h.该研究为分析LpPEX5蛋白的活性、验证蛋白间的相互作用等后续试验研究奠定了基础.

关键词：细叶百合、过氧化物酶体生物合成蛋白、蛋白表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：30

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金资助;黑龙江省自然科学基金联合引导项目

在线出版日期：2020-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：417-423,448