IL35慢病毒质粒的提取

摘要：

”目的”构建可以大规模提取IL35的新型质粒pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35.”方法”质粒pLVX-IRES-ZsGreen1和pUC57-mus-IL35-拼接用XhoⅠ和NotⅠ进行双酶切,将回收纯化的目的片段mus-IL35-拼接(NotⅠ/XhoⅠ)与回收纯化的载体pLVX-IRES-ZsGreen1(NotⅠ/XhoⅠ)连接,连接产物命名为pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35-拼接.连接产物转化DH5α感受态细胞,涂布LB Amp平板,37℃温箱培养过夜.”结果”检测慢病毒pLVX-IL35滴度为:6×107TU/ml,提取质粒浓度为1～2 mg/ml.鉴定引物为测序的通用引物,上游引物和下游引物离MCS区域加上目的序列,目的PCR条带大约1600 bp,送鉴定正确菌液测序.测序结果比对正确.”结论”采用新型超量无内毒素质粒提试剂盒,可以大规模方便快速提取相关质粒.

关键词：pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35、慢病毒、PCR、质粒

所属期刊栏目：29

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：深圳市博士创新项目SZBC2017018

在线出版日期：2019-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：35-38