牛妊娠相关糖蛋白BoPAG1的制备及生物信息学分析

摘要：

[目的]获得高效表达并且抗原性较好的BoPAG1(bovin Pregnancy associated glycoproteins 1)蛋白,并分析其生物信息学功能.[方法]扩增荷斯坦奶牛BoPAG1基因,并将其连接在表达载体pET-30a,并转化至大肠杆菌(DE3)中表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测其免疫学特性,采用生物信息学方法对BoPAG1基因编码蛋白的蛋白修饰、结构、线性B细胞抗原表位进行预测分析.并对不同物种间的PAG1以及荷斯坦奶牛BoPAG的氨基酸做同源性分析.[结果]成功克隆BoPAG1基因并表达相应蛋白,大小与预期结果相符,预测BoPAG1蛋白具有18个B细胞抗原表位,其N端具有15个氨基酸组成的信号肽,并且有4处N连接糖基化,不同物种间PAG1氨基酸的同源性为95.1％ ～97.9％,BoPAG蛋白家族氨基酸的同源性为86.4％ ～97.2％.[结论]成功表达并纯化获得了BoPAG1蛋白.BoPAG1蛋白N连接糖基化有4处并且预测出18个B细胞抗原表位以及15个氨基酸组成的信号肽.不同物种间PAG1及BoPAG蛋白家族同源性较高.为BoPAG1蛋白抗体的制备和功能的研究提供了基础.

关键词：妊娠相关糖蛋白、原核表达、Western Blot、生物信息学分析

所属期刊栏目：29

分类号：Q784(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金31760668

在线出版日期：2019-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：29-34,89