基于免疫印迹定量分析的总蛋白提取方法比较

摘要：

[目的]基于改良的对比蛋白提取结果的方法,探讨两种不同总蛋白提取方法对不同丰度蛋白提取得率的影响.[方法]小胶质细胞株N9总蛋白及商品化预染蛋白标准品,行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),三种常用图像软件定量免疫印迹结果,比较线性相关系数R2;选择R2值最高的软件,灰密度定量不同丰度p-IκBα经RIPA裂解液法和Minute试剂盒法蛋白提取后免疫印迹检测的p-IκBα蛋白得率.[结果]三种软件定量分析同一免疫印迹结果显示,Image Studio Lite的上样量与条带灰密度值的R2最大(R2 =0.998);运用Image Studio Lite定量免疫印迹检测p-IκBα高丰度组,发现使用RIPA裂解液法比Minute法的p-IκBα提取得率高出7.5％,而p-IκBα低丰度组,前者p-IκBα的得率只有后者的41％,差异显著(P＜0.05).[结论]Minute试剂盒法在免疫印迹检测中对低丰度蛋白具有高提取得率的优越性.

关键词：免疫印迹、定量分析、Minute总蛋白提取法、RIPA

所属期刊栏目：28

分类号：Q5-33

资助基金：国家自然科学基金HSP90β/STAT3;No.81302412

在线出版日期：2018-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：366-371