10.16519/j.cnki.1004-311x.2018.03.0043
V1C、G116D、N171H定点突变对黑曲霉(Aspergillus niger)XZ-3S木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响
”目的”探索V1C、G116D、N171H定点突变对木聚糖酶XynZF-2热稳定性的作用.”方法”生物信息学方法确定木聚糖酶XynZF-2可突变位点,引入Cys、Asp、His;定点突变V1C、G116D、N171H,PCR扩增突变基因xynCDH,构建大肠杆菌表达载体,转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达目的蛋白并测定酶活,分析酶学性质.”结果”突变酶XynCDH的最适温度由40℃上升到45℃.40℃条件下突变酶XynCDH半衰期t1/240℃由55 min延长到60 min;在45℃条件下,突变酶XynCDH的半衰期t1/245℃由7min提高到15 min.”结论”定点突变V1C、G116D、N171H能增强木聚糖酶XynZF-2热稳定性,为加深木聚糖酶分子改造的研究提供参考.
木聚糖酶、生物信息学、定点突变、热稳定性
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Q814(生物工程学(生物技术))
河南省科技攻关计划项目“耐温性木聚糖酶杂合酶的构建及酶学特性研究”,162102210118;河南省高校重点科研项目“提高木聚糖酶耐高温性的分子改造研究”,17A180035
2018-09-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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