昆虫细胞表达鲎C因子内毒素活性检测的研究

摘要：

”目的”开发一种低成本的内毒素检测试剂和方法.”方法” Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达重组鲎凝血C因子,利用动态荧光法进行内毒素检测活性分析.将细胞培养基经过超滤处理,分析其对内毒素检测灵敏度的影响;分析低温储存的检测试剂在不同储存时间,内毒素的检测活性.”结果”经过超滤处理的培养基,内毒素检测灵敏度明显提高,可达到0.05 EU/mL,检测时间90 min内完成;检测试剂在-20℃保存6个月内,检测灵敏度仍可以达到0.1EU/mL.”结论”在昆虫细胞中合成的重组鲎凝血C因子,无需经过蛋白纯化,直接将培养上清用于内毒素检测,灵敏度为0.1～0.05 EU/mL,高于普通鲎试剂的检测水平.

关键词：鲎凝血C因子、杆状病毒表达系统、内毒素检测、动态荧光法

所属期刊栏目：27

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省科技支撑计划项目“基因工程技术制备生产细菌内毒素检测试剂”,BE2014638;江苏省自然科学基金-青年基金项目“昆虫细胞表达系统稳定高效合成AAV-ITR基因表达微载体”,BK20160364

在线出版日期：2017-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：478-483