大鼠Scratch2蛋白锌指结构域的表达与纯化

摘要：

”目的”原核表达大鼠Scratch2基因的C2H2型锌指结构域,纯化获得GST-C2H2融合蛋白.”方法”以新鲜大鼠前额叶脑组织cDNA为模板,利用PCR扩增带有EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点的Scratch2基因的锌指结构域后,构建原核表达载体pGEX-4T-1-C2H2,并将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导融合蛋白表达,再利用MagneGSTparticles亲和纯化GST-C2H2融合蛋白,最后通过Western Blot鉴定此融合蛋白.”结果”成功构建了pGEX-4T-1-C2H2原核表达载体;在20℃、0.2 mmol/L的IPTG诱导下,GST-C2H2融合蛋白即可有效地表达;经MagneGST particle纯化的GST-C2 H2蛋白可被识别Scratch2锌指结构域的抗体所识别.”结论”纯化的GST-C2H2蛋白可用于后续研究.

关键词：Scratch2、锌指结构域、原核表达、蛋白纯化

所属期刊栏目：27

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目“调节GALR2基因关键转录因子的鉴定及其在抑郁中的作用”,31271154,“甘丙肽及其受体在深部脑磁刺激抗抑郁过程中的作用机制研究”,81671345;北京市自然科学基金项目“miR-15b在抑郁症发生中的作用及机制研究”,7162016

在线出版日期：2017-12-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：440-445,451