改造thrL前导调控元件获取不同灵敏度苏氨酸感应器

摘要：

[目的]构建不同灵敏度的苏氨酸感应器,以报告基因的表达表征苏氨酸的变化.[方法]通过克隆苏氨酸操纵子thrL前导调控元件,并与红色荧光蛋白基因rfp偶联构建在高拷贝质粒pLX07上,转化进大肠杆菌DH5α;之后又通过设计引物进行PCR改变thrL前导调控元件上苏氨酸密码子的编码数量;最后进行荧光检测实验确定不同突变菌感应环境中苏氨酸特性的不同.[结果]得到了以红色荧光蛋白基因为报告基因而能感应苏氨酸的大肠杆菌以及分别编码4个和10个苏氨酸密码子的thrL突变菌.三种菌株单位OD下红色荧光蛋白的相对表达量均跨2个浓度梯度而负相关于苏氨酸浓度,同一浓度下正相关于苏氨酸密码子编码数量.[结论]通过构建感应苏氨酸大肠杆菌并改造其thrL前导调控元件获得了负相关于苏氨酸浓度且灵敏度不同的苏氨酸感应器.

关键词：苏氨酸、thrL前导调控元件、密码子、红色荧光蛋白、灵敏度

所属期刊栏目：26

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）;天津市重点专项

在线出版日期：2016-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：372-379