10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.02.0028
牛病毒性腹泻病毒E2抗原表位表达及验证
[目的]获得高效表达的重组牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhoea virus,BVDV)E2免疫抗原蛋白.[方法]应用软件分析BVDV-E2蛋白抗原表位,将富含抗原表位基因片段连接表达载体pGEX-4T-1,并转化至大肠杆菌(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot检测诱导表达蛋白,经镍柱分离纯化;以纯化蛋白为包被抗原,用间接ELISA检测抗原对免疫血清的反应性.[结果]成功克隆BVDV-E2抗原表位基因,并在大肠杆菌中高效表达,Western Blot和ELISA证实表达重组蛋白对BVDV阳性血清具有反应原性.[结论]获得大小为49.5 kDa的BVDV-E2抗原表位蛋白,并且该抗原稀释度在1:40,抗体稀释度在1:20时结合效果最佳.可用于后续的纳米抗体筛选的研究.
抗原表位、E2蛋白、Western Blot、间接ELISA
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Q784(基因工程(遗传工程))
国家国际科技合作专项基金No.2013DFR30970
2016-06-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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