人β-淀粉样肽Aβ42的融合表达与纯化

摘要：

”目的”建立一种快速可靠、获取足量和高纯度的人β-淀粉样肽(Aβ2)的方法.”方法”首先利用重叠PCR技术扩增获得Aβ2基因全长.随后将基因连入pGEX-4T-1载体,利用GST系统表达融合蛋白.分别在16℃、25℃、30℃和37℃诱导表达,SDS-PAGE检测融合蛋白的表达情况,确定表达的最佳温度.根据优化条件进行目的蛋白的大量表达,利用Gstrap FF柱亲和纯化GST-Aβ42融合蛋白.”结果”成功构建pGEX/Aβ42表达载体,确定30℃为诱导表达的最佳温度.大量表达并经过纯化可获得分子量为30.7 kDa的融合蛋白.”结论”利用GST融合系统表达纯化可得到纯度超过90％的GST-Aβ42融合蛋白,重组蛋白的产率约为1.2 mg/L培养基.当用凝血酶切除GST融合标签后,Aβ42易聚集沉淀.

关键词：人β-淀粉样肽、Aβ42、GST表达系统、融合蛋白、亲和纯化

所属期刊栏目：26

分类号：Q816(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2016-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：146-151