大鼠STIM1基因真核表达载体构建及蛋白表达定位

摘要：

[目的]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞中表达、定位.[方法]应用基因合成方法获得STIM1基因序列,克隆至携带EGFP标签的真核表达载体pEGFP-C1、pIRES2-EGFP,经菌落PCR、酶切、测序鉴定后,转染至A7r5细胞,Western Blot检测蛋白表达,激光共聚焦观察其定位.[结果]STIM1全长2 058 bp,重组载体经酶切、PCR、测序鉴定构建正确,在A7r5细胞内高表达,并主要定位于细胞质.[结论]构建大鼠STIM1基因重组质粒并在A7r5细胞质中表达,为建立稳定高表达细胞系及后续功能研究奠定基础.

关键词：STIM1、真核载体、蛋白表达、A7r5细胞

所属期刊栏目：26

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：福建医科大学重大科研项目No.09ZD010

在线出版日期：2016-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：113-118