嵌合HCV串联多表位的乙肝S基因真核载体构建及表达

摘要：

[目的]构建丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)串联多中和抗原表位与乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)S抗原嵌合基因真核表达质粒,并在293T细胞中进行表达.[方法]将HCV基因中高度保守且具有广谱交叉中和活性的三个表位和一个HVR1模拟表位串连.串联表位嵌合于HBV S基因的氨基端胞外区,形成嵌合基因MEpS;将基因克隆至真核表达载体pCI-neo中,构建重组质粒pCI-MEpS.将质粒转染至293T细胞中,间接免疫荧光及Western Blot检测嵌合基因的表达情况.[结果]重组质粒经双酶切证实构建正确;pCI-MEpS转染的293T细胞胞浆内可见较强的绿色荧光,Western Blot显示pCI-MEpS在相对分子量约38 kDa处可见蛋白条带.[结论]构建了HBVS抗原嵌合HCV串联多中和抗原表位的重组质粒,成功在293T细胞中表达,为制备嵌合HCV串联多中和抗原表位的HBV S抗原VLPs,研究嵌合VLPs免疫动物后产生的中和抗体的保护作用奠定了实验基础.

关键词：丙型肝炎病毒、中和抗原表位、乙型肝炎病毒、S抗原、基因表达

所属期刊栏目：26

分类号：R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金;乙肝S抗原为载体的HCV嵌合病毒样颗粒预防疫苗的初步实验研究资助

在线出版日期：2016-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：12-17