人α防御素2真核表达载体的构建及表达

摘要：

目的:构建人α防御素2(α-HNP2)真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,并实现其在CHO细胞中的表达,初步鉴定表达蛋白的抑菌活性.方法:以PBMC细胞总RNA为模板,利用RT-PCR法,扩增得到α-HNP2基因,构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(+)/α-HNP2,脂质体法转染CHO细胞,G418筛选稳定表达的阳性克隆.用RT-PCR和Western blot检测α-HNP2蛋白的表达,同时检测表达产物的抑菌活性.结果:经PCR、酶切和DNA测序分析表明重组载体构建成功,并在CHO细胞中表达融合蛋白,琼脂平板扩散实验结果表明融合蛋白在大肠杆菌平板上形成明显抑菌圈.结论:CHO细胞中表达有活性的融合蛋白α-HNP2,为进一步的实验研究奠定了基础.

关键词：防御素、CHO、融合蛋白、基因表达

所属期刊栏目：24

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：贵州省科技计划LKZ201039

在线出版日期：2014-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：21-25