10.3969/j.issn.1004-311X.2014.04.0089
鸟分枝杆菌的分离鉴定及其基因组文库构建
目的:构建鸟分枝杆菌基因组文库.方法:利用16S rRNA基因测序法对15例HIV/AIDS患者痰分枝杆菌培养阳性标本进行菌种鉴定,分离出鸟分枝杆菌.鸟分枝杆菌基因组DNA和pUC19载体经同尾酶Sau3A Ⅰ和Bam H Ⅰ分别酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌JM109而获得文库.通过计算文库滴度、酶切分析克隆子来评价文库质量.结果:15株分枝杆菌经鉴定,有9株结核分枝杆菌、4株鸟分枝杆菌和2株脓肿分枝杆菌.所构建鸟分枝杆菌基因组文库滴度为2.58×105 cfu/ml.随机挑选9个克隆进行Bam H Ⅰ酶切分析,可见到插入片段大小约在0.5kb~1kb之间.结论:从HIV/AIDS患者中分离出鸟分枝杆菌,并成功构建了鸟分枝杆菌基因组文库,为研究鸟分枝杆菌致病基因的结构和功能提供了基础.
鸟分枝杆菌、分离鉴定、基因组文库
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Q786(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金项目“鸟分枝杆菌在巨噬细胞内生存机制的研究”,No.81260245资助
2014-09-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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