DNA甲基化敏感位点(CCGG)文库克隆载体的构建

摘要：

目的:旨在建立一种简便易行的DNA甲基化文库构建载体,用于筛选细胞中具有甲基化敏感性CCGG位点的DNA片段.方法:根据HpaⅡ/MspⅠ酶切体系对甲基化酶敏感性不同的特点,通过在PCR引物中添加CCGG酶切位点的方法,将扩增得到的目的片段连接到无CpG甲基化的质粒载体上.结果:成功构建了含双CCGG位点的pCpGfree-HpaⅡ/MspⅠ-1质粒载体.结论:所构建的pCpGfree-HpaⅡ/Msp Ⅰ-1质粒载体CCGG位点未发生甲基化,故可以用于构建含有甲基化CCGG序列的DNA甲基化文库.

关键词：DNA甲基化、CCGG位点、甲基化文库、HpaⅡ/Msp Ⅰ酶切体系

所属期刊栏目：24

分类号：Q291

资助基金：辽宁省十百千高端人才引进项目百人层次基金“乳腺癌干细胞的分离与诊断、治疗试剂盒制备”,编号:521082403-880303-88030312004资助

在线出版日期：2014-09-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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