两拷贝β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达

摘要：

目的:旨在获得高效分泌表达的两拷贝β-甘露聚糖酶(β-mannase)毕赤酵母工程菌株.方法:以作者研究室保藏的黑曲霉β-mannase X33菌株(X33-β-mannase)为出发菌株,体外构建两拷贝重组质粒pPIC-mannase,用电击法转化至X33感受态细胞,用抗生素Zeocin筛选阳性转化子,用BMGY培养基培养,BMMY诱导其表达,利用DNS法测定酶活.结果:实验已成功构建了两拷贝β-mannase毕赤酵母工程菌株,50 L发酵罐培养7d后,β-mannase产酶水平达到21 300 U/ml.

关键词：β-甘露聚糖酶、感受态细胞、毕赤酵母

所属期刊栏目：24

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2014-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：24-28