黑曲霉外源表达系统对Dactylellina cionopapa基因PrD Ⅰ的表达

摘要：

目的:Dactylellina cionopaga是产生黏性分枝的捕食线虫真菌,进行其基因外源表达是鉴定该菌侵染相关因子的途径之一.方法:该文构建了含有组氨酸标签的黑曲霉表达载体pGT21M -HIS,对D.cionopaga中与侵染机制相关的丝氨酸蛋白酶基因PrDⅠ进行了外源表达.结果:RT - PCR鉴定结果显示,PDⅠ在黑曲霉201中获得了转录.SDS - PAGE和酶活分析结果表明,经亲和层析纯化的重组蛋白分子量约为45kDa,在pH5.0的条件下具有蛋白水解活性.纯酶液的蛋白浓度为30μg/ml.结论:构建的带有组氨酸标签的表达载体pGT21M -HIS能够用于基因在黑曲霉表达系统中的外源表达,并为目的蛋白的纯化和鉴定提供了极大便利.黑曲霉外源表达系统在表达丝状真菌基因方面相对其他表达系统具有优势.

关键词：食线虫真菌、Dactylellina cionopaga、丝氨酸蛋白酶、外源表达、黑曲霉、表达载体

所属期刊栏目：22

分类号：Q933(微生物学)

资助基金：中国博士后科学基金面上项目20070410155

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：38-43