羊传染性脓疱病毒新疆流行株F1L基因克隆及表达

摘要：

目的:为了探讨F1L重组蛋白作为羊传染性脓疱病毒亚单位疫苗的可行性.方法:以分离出羊传染性脓疱病毒ORFV- shz分离株为模板,扩增F1L基因片段,并将其克隆至pMD18 -T载体中进行测序.构建原核表达载体pET - 32a - F1L,转化至大肠埃希菌BL21,用SDS - PAGE及Western blot检测目的蛋白的表达情况及其反应原性.结果:PCR扩增出F1L基因全长1023bp,共编码340个氨基酸;推导的氨基酸序列中第1-70位氨基酸构成信号肽序列,第285～313位氨基酸为跨膜区.SDS -PAGE分析表明获得了约57.4kDa的融合蛋白,在Western - blotting检测中,融合蛋白可与羊传染性脓疱病毒阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性.结论:成功构建F1L基因的原核表达载体,为研究新疆地区羊传染性脓疱的防治及疫苗开发提供了科学依据.

关键词：羊传染性脓疱病毒、F1L基因、序列分析、原核表达、反应原性

所属期刊栏目：22

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家"973"计划项目2010CB30203;国际科技合作项目2006DFA33740

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：13-16