带有穿膜肽重组PTD-Sox2的制备及活性鉴定

摘要：

目的:制备带有穿膜肽的重组蛋白PTD-Sox2并对其活性进行鉴定.方法:通过将Sox2基因与穿膜肽基因PTD融合,利用原核表达载体pKYB进行表达,用Ni柱制备、纯化融合蛋白;用Western blot对其进行鉴定;用FITC标记PTD-Sox2,与CHO细胞孵育,检测其穿膜能力;用FRET法检测转录因子Sox2结合目的DNA的活性.结果:构建了带有穿膜肽重组PTD-Sox2的原核表达菌,制备并纯化PTD-Sox2,对其活性鉴定.结论:PTD-Sox2能够穿过细胞膜与核膜,进入细胞核内,穿膜效率为40.86%,并且可与目的DNA进行特异结合,为蛋白体外诱导iPS的产生奠定基础.

关键词：PTD-Sox2、iPS、核转录因子、原核表达、FITC、FRET

所属期刊栏目：21

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金项目资助Supported bv the National Natural Science Foundation of China30973244

在线出版日期：2011-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：23-29