根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因的克隆及原核表达

摘要：

目的:获得根癌土壤农杆菌Ti质粒VirE2基因原核表达蛋白,为研究其功能打下基础.方法:利用PCR方法,根据发表的根癌农杆菌 (Agribacterium tumefaciens) C58Ti质粒基因序列,设计1对引物扩增了C58根癌土壤农杆菌Ti质粒毒性区蛋白VirE2基因,连接T载体经测序,结果与发表的序列同源性达100%.将目的片段从T载体上切下,连接至原核表达载体PET30a上,转化E.coli DH5α,筛选出阳性克隆,提质粒转化E.coli BL21,用IPTG诱导表达.结果:经SDS-PAGE电泳,发现与对照比较在略小于66kDa处有特异条带,与理论大小(63.5kDa)相符.结论:克隆的VirE2基因获得了原核表达.

关键词：VirE2基因、克隆、表达

所属期刊栏目：20

分类号：Q785;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家转基因专项"转基因棉花环境安全评价技术",2008ZX08011-002

在线出版日期：2010-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：13-16