纳豆激酶基因的表达及纯化

摘要：

利用PCR方法从分泌纳豆激酶的枯草杆菌基因组DNA中扩增得到纳豆激酶基因(NK),利用基因重组技术构建了纳豆激酶基因的表达载体pETNK.在IPTG诱导下,实现了在大肠杆菌中高效表达,经SDS-PAGE电泳分析和薄层扫描结果显示,表达的目的蛋白占菌体蛋白的21.5%.将表达产物经过DEAE-Cellulose-DE52和Sephedax-G100两个柱分离纯化,得到纯的纳豆激酶蛋白干粉,经琼脂糖-纤维蛋白平板法测出1mg纳豆激酶干粉的溶栓活性相当于2000u尿激酶.从基因工程角度研究纳豆激酶基因的克隆、表达及纯化,为用基因工程菌生产纳豆激酶奠定了基础.

关键词：纳豆激酶基因、克隆、表达、纯化、活性测定

所属期刊栏目：13

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：黑龙江省自然科学基金c01-23

在线出版日期：2004-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：12-15