重组幽门螺杆菌ureA,ureB低温表达、纯化及抗原鉴定

摘要：

目的:建立经济有效的方法,从大肠杆菌表达、纯化重组幽门螺杆菌尿素酶A、B亚单位.方法:含重组表达质粒pGEX-2T/ureA,pGEX-2T/ureB大肠杆菌分别在不同浓度IPTG、不同温度条件下作诱导培养,以SDS-PAGE分析表达产物,采用谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析分离纯化表达产物,以Western-blotting和ELISA对纯化产物作抗原性分析鉴定.结果:IPTG诱导浓度为0.1mmol/L;诱导温度为28℃,含重组质粒大肠杆菌表达可溶性融合蛋白GST-ureA、GST-ureB各约占总表达产物的78%和87%.经亲和层析,得纯度90%以上的GST-ureA约为14mg/L,GST-ureB约为18mg/L;融合蛋白呈ureA、ureB抗原性反应.结论:建立了低温诱导及纯化高纯度ureA、ureB基因表达产物的方法,所得纯化产物具有ureA、ureB抗原活性,为进一步的应用研究打下基础.

关键词：幽门螺杆菌、尿素酶、低温培养、表达、纯化

所属期刊栏目：13

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2003-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：6-8