化学抑制剂Woodward′s Reagent K对来源于Erwinia rhapontici NX 5蔗糖异构酶的抑制动力学

摘要：

从重组大肠杆菌E?coli BL21（ pET22b palⅠ）中纯化得到来源于Erwinia rhapontici NX 5的蔗糖异构酶（sucrose isomerase，SIase，EC 5?4?99?11），以纯酶为对象考察其酶活力抑制动力学。结果表明：SIase 纯比酶活1512?77 U／mg，动力学常数 Km＝260 mmol／L，Vmax＝39?41μmol／（L·s）。以化学抑制剂 Woodward′s Reagent K （WRK）对重组蔗糖异构酶进行抑制反应，反应体系中随着WRK浓度的升高，SIase与底物蔗糖的亲和力常数Km增大，最大反应速度Vmax在一定范围内保持稳定。通过对SIase的抑制动力学分析可得到，WRK对SIase的抑制类型为可逆的竞争性抑制，这可能与WRK与蔗糖的结构类似，与可竞争性的结合SIase的活性中心有关。

关键词：蔗糖异构酶、抑制动力学、化学抑制剂Woodward′s Reagent K

分类号：Q5(生物化学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2012AA021503；国家自然科学基金31371732；教育部博士点基金20103221110006；江苏省普通高校研究生科研创新计划CXZZ12＿0418

在线出版日期：2015-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：62-66,95