脯氨酸4羟化酶在大肠杆菌中的密码子优化表达及对反式4羟脯氨酸生物合成的作用

摘要：

为了使脯氨酸4羟化酶基因在重组大肠杆菌中得到高表达，通过调整大肠杆菌密码子偏好性以及mRNA二级结构，使得脯氨酸4羟化酶基因得到优化。将优化后的脯氨酸4羟化酶基因插入含有色氨酸串联启动子的pUC19质粒，构建重组质粒pUC19 ptrp2 Hyp，并导入大肠杆菌BL21（ DE3）中。在摇瓶水平，重组菌以L 脯氨酸为底物发酵8 h，可积累（0?492±0?034） g／L 的反式4羟脯氨酸。在发酵罐水平，通过补料分批发酵来提高反式4羟脯氨酸的产量，当补糖速率为18 g／h时，反式4羟脯氨酸的产量高达42?5 g／L，反式4羟脯氨酸产率为0?966 g／（ L·h）。

关键词：重组大肠杆菌、脯氨酸 4 羟化酶、反式 4 羟脯氨酸、密码子优化、发酵、条件优化

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30800018、30970058；高等学校博士学科点专项科研基金200802951036；工业生物技术教育部重点实验室主任基金 KLIB ZR200801；江苏省自然科学基金BK2012554

在线出版日期：2015-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：44-51