Serratia marcescens H30脂肪酶的重组可溶表达、固定化及其酶学性质

摘要：

为了提高Serratia marcescens H30脂肪酶的可溶表达水平，分别将目的基因与 pGEX 4T 1、pET28a和pET32a构建重组表达载体，转入大肠杆菌BL21（ DE3），通过优化诱导过程，发现可溶性酶的最高活性可达25000 U／L。再经Ni2＋亲和柱纯化、LH EP 固定化后，固定化酶的比酶活为214 U／g（以1 g湿质量计），酶活回收率为51％。固定化后重组脂肪酶的最适温度由30℃提高到35℃，最适pH从7?0偏移至8?0左右，并且稳定性也有所增加。该固定化重组脂肪酶同样能够拆分消旋体反式4甲氧苯基缩水甘油酸甲酯，光学选择性没有改变。反应14 h，转化率为48?5％，底物的e?e．值为99?2％，表明该固定化脂肪酶能有效拆分消旋体反式4甲氧苯基缩水甘油酸甲酯，为工业生物催化制备地尔硫卓提供了可能。

关键词：黏质沙雷氏菌、脂肪酶、可溶表达、固定化、手性拆分

分类号：TQ925(其他化学工业)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2012CB721103、2012CB721003；国家高技术研究发展计划863计划2012AA022206B、2012AA020403；国家自然科学基金31201296／C200101；中央高校基本科研业务费专项资金；生物反应器工程国家重点实验室开放课题

在线出版日期：2015-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：33-38