Cre／LoxP重组系统的改造及在树干毕赤酵母中的应用

摘要：

为了实现在P?stipitis中进行无痕基因敲除，以Cre/LoxP系统为研究对象，首先通过同源重组构建尿嘧啶营养缺陷型树干毕赤酵母（ ura3-）；同时通过定点突变pSH47 Hpt质粒的hpt基因和cre基因，将CDS区CTG突变为TTG；最后以乙醛脱氢酶基因为靶基因，验证突变后的Cre/LoxP系统在P?stipitis进行无痕基因敲除的可行性。结果表明：本文在P?stipitis中成功使用潮霉素B抗性标记，经过修饰后的Cre/LoxP敲除系统能够在P?stipitis中无痕敲除目的基因，为后续研究P?stipitis功能基因和改造代谢途径提供了一种试验方法和筛选标记。

关键词：树干毕赤酵母、基因敲除、Cre/LoxP重组、潮霉素B

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：江苏省自然科学基金 BK2011153，BK2012363；教育部“新世纪优秀人才支持计划”NCET 110665

在线出版日期：2014-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：39-45