腈水解酶psn基因工程菌的发酵及产酶条件优化

摘要：

来自恶臭假单胞菌的腈水解酶具有高效催化3氰基吡啶产烟酸的能力，对表达该酶的基因psn进行发酵和产酶条件优化，通过对C源、N源、磷酸盐、金属离子、温度、诱导剂浓度和诱导时间进行单因素考察，获得最适培养基条件（ g/L）：葡萄糖5、蛋白胨15、酵母粉5、（ NH4）2 SO45、K2 HPO424?5、KH2 PO45?76、MgSO40?48；最佳诱导条件：培养2?5 h后添加IPTG诱导，浓度0?2 mmol/L，诱导温度30℃。在该条件下培养，重组大肠杆菌的腈水解酶比酶活可达到45?67 U/mL，比优化前提高了2?26倍。在此基础上，于5 L发酵罐上进行C、N源的补料研究，获得最适分批补料策略，发现其腈水解酶活力可达到75?40 U/mL，是优化前的3?74倍。

关键词：腈水解酶、烟酸、发酵、分批补料培养

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金21206055；江苏省自然科学基金BK2012127

在线出版日期：2014-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：7-13