构建羰基还原酶基因工程菌生物转化产l-麻黄碱

摘要：

以筛选得到的Morganella morganii J-8细茵的基因组为模板,通过PCR扩增得到目的基因mdlh2.核苷酸序列测定结果表明,基因全长1 046 bp.以pET28a(+)为表达栽体,构建重组质粒pET28a(+)-mldh2,并在E.coliBL21(DE3)中表达.利用表达产物进行生物转化,发现其具有催化底物1-苯基-2-甲氨基丙酮(简称MAK)产l-麻黄碱的活力.进一步考察了诱导时间和IPTG浓度对重组茵表达的羰基还原酶的影响,37℃下用0.5 mmol/L的IPTG诱导4 h,重组羰基还原酶的酶活达到0.2 U/mg蛋白,转化液中l-麻黄碱质量浓度达到45 mg/L.

关键词：不对称还原、羰基还原酶、麻黄碱

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分类号：Q789;TQ920.6(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30770054;国家高技术研究发展计划863计划资助项目2007AA100402

在线出版日期：2009-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：29-33