10.3969/j.issn.1672-3678.2006.04.003
纤维素酶基因在毕赤酵母中的拷贝数对其表达的影响
将PCR扩增得到的瑞氏木霉纤维素内切酶Ⅲ(Endo-β-1,4-glucanase Ⅲ,EGⅢ)基因片段插入巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)质粒pPIC9K中,构建了EGⅢ的分泌表达质粒pPIC9K-eg3,然后经线性化后电转化导入P.pastoris GS115受体菌中.获得的阳性克隆经SDS-PAGE和酶活检测,证明工程菌株发酵上清液中含有表达的EGⅢ蛋白并具有纤维素内切酶酶活.通过荧光定量PCR确定了各菌株的拷贝数并对不同拷贝数范围的菌体生长和EGⅢ的表达做了比较.实验结果表明,低拷贝重组菌有着相对较好的EGⅢ表达量.
内切纤维素酶EGⅢ、巴斯德毕赤酵母、表达、拷贝数
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Q7;S963.327
国家重点基础研究发展计划973计划2003CB716000;国家自然科学基金30370036;国家重点实验室基金
2007-01-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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