去泛素化酶USP10通过稳定Smurf1抑制TGF-β/BMP信号通路
目的 探究生理条件下去泛素化酶USP10调控的关键信号通路及分子机制.方法 利用GEO2R和Metascape对Usp10+/+和Usp10-/-新生小鼠肾组织基因芯片(GSE198574)差异表达基因和通路富集分析,使用免疫印迹实验和免疫组化技术检验核心转录因子的表达情况;进一步利用免疫印迹检测该信号通路,并通过基因芯片和免疫组化分析候选分子的表达情况;使用免疫共沉淀(Co-IP)和GST-pulldown实验验证USP10与候选分子的相互作用,通过泛素化实验明确USP10对底物分子的调控机制;利用免疫印迹检测细胞增殖、凋亡相关蛋白p21、Cleaved-caspase3的表达情况,使用CCK-8和克隆形成实验分析USP10对细胞增殖的影响.结果 Usp10-/-新生小鼠肾组织中TGF-β/BMP通路激活,USP10在小鼠体内缺失后导致Smad泛素相关因子1(Smurf1)蛋白质水平降低,Smad1/5蛋白质水平上调,却不影响它们的转录水平;机制上,USP10与Smurf1存在相互作用,并依赖其去泛素化酶活性去除Smurf1多聚泛素化.Usp10敲除后促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达上调,并抑制细胞的增殖能力.结论 USP10通过去泛素化并稳定Smurf1,抑制TGF-β/BMP信号通路,从而维持小鼠组织器官和细胞增殖稳态.
USP10、Smurf1、Smad1/5、去泛素化、细胞增殖
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Q2;Q28
国家重点研发计划;国家重点研发计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金
2023-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
760-769
