基于转录组学的白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究
目的 白扁豆总皂苷是中药白扁豆经过提取分离纯化步骤制备得到,关于白扁豆的总皂苷成分如何影响前列腺癌细胞系PC-3细胞的生长情况缺少研究.因此,有必要探讨白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究.方法 本研究采用CCK8方法检测不同浓度的白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的影响.利用转录组学分析白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的分子机制,并且进一步通过实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验对相关差异基因的表达进行验证.利用Western blot和CCK8检测白扁豆总皂苷处理过表达醛脱氢酶7家族成员Al(ALDH7A1)的PC-3细胞存活率.结果 随着白扁豆总皂苷浓度升高,前列腺癌细胞PC-3的存活率显著下降,白扁豆总皂苷的IC50值为1 086mg/L.转录组学测序结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的细胞中有2 360个差异表达基因,其中1 982个基因上调,378个基因下调.基因功能注释(GO)结果显示,差异表达基因显著富集到与有丝分裂纺锤体检查点(mitotic spindle checkpoint)、纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint)等一系列跟癌症的发生发展密切相关的生物学过程.此外,基因组京都百科全书(KEGG)分析结果也显示,差异表达基因富集在肿瘤代谢等信号通路.进一步对其中的差异基因进行验证,结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的前列腺癌细胞中ALDH7A1、甘氨酸C-乙酰转移酶(GCAT)和磷酸甘油酸变位酶家族成员4(PGAM4)的蛋白质表达水平明显降低(P＜0.05),而二甲基甘氨酸脱氢酶(DMGDH)和胱硫醚β合成酶样(CBSL)的蛋白质表达水平显著升高(P＜0.001).体外细胞实验结果表明,白扁豆总皂苷通过下调前列腺癌细胞中ALDH7Al的表达抑制PC-3细胞生长.结论 白扁豆总皂苷可能通过下调ALDH7Al表达从而在体外抑制前列腺癌细胞的生长.
前列腺癌、白扁豆总皂苷、转录组学测序
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R737;R285(肿瘤学)
四川省科技厅基础项目2019YJ0614
2022-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共10页
1597-1606
