gbpC和gbpD基因在盘基网柄菌细胞趋化性和趋电性运动中的差异研究
目的 趋化性和趋电性是细胞定向迁移的主要方式,并在生物有机体的生理和病理过程中发挥重要作用,但二者存在差异.本文对盘基网柄菌gbpC和gbqD基因在细胞趋电性和趋化性中的作用进行对比研究,以寻找两种迁移方式之间的新差异.方法 将gbpC基因突变株gefT-和gbpD基因突变株gefU-分别置于场强为12 V/cm的直流电场中,分析细胞在电场中的运动方向及运动速度,探讨细胞的趋电性变化;利用电穿孔技术将标记F-actin的Lifeact-GFP质粒转化进入细胞,用荧光显微镜观察活细胞运动时F-actin的分布;用蛋白质印迹技术定量分析细胞的肌球蛋白调节轻链(RLC)在受直流电场刺激后的磷酸化变化情况.结果 gefT-突变株细胞极化消失,但保持与野生型类似的趋电性;gefU-突变株细胞发生超极化,但趋电性显著降低.在直流电场中,突变株细胞和野生型细胞的F-actin主要分布在伪足部位.在电场作用下,细胞株的肌球蛋白RLC磷酸化变化情况存在差异,即野生型细胞以时间依赖的方式发生磷酸化,gefT-突变株细胞先急剧下降,然后再上升,gefU-突变株细胞却以时间依赖方式脱磷酸化.结论 本研究表明gbpC和gbpD基因在盘基网柄菌趋化性和趋电性中的作用不同,暗示了电信号与化学信号确实通过不同的机理指导细胞的定向迁移.
盘基网柄菌、趋化性、趋电性、RasGEF结构域
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Q26;Q27(细胞生物化学)
国家自然科学基金;云南师范大学生命科学学院、生物能源持续开发利用教育部工程研究中心;云南省生物质能与环境生物技术重点实验室开放基金资助项目
2022-09-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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